8 Цитогенетические методы в генетике человека


Приготовление и окрашивание препаратов метафазных хромосом человека методом клеточных культур. В зависимости от целей исследования культуры клеток получают из клеток кожи, костного мозга, эмбриональных тканей, хориона, клеток хориона и амниотической жидкости. Чаще всего используют лимфоциты перифирической крови.

Методика включает следующие этапы анализа:

а) В пробирку с кровью с питательной средой добавляется фитогемагглютинин ФГА для стимуляции митозов лимфоцитов;

б) Для накопления метафаз делящихся лимфоцитов добавляется колхицин, разрушающий аппарат клеточного деления;

в) Для набухания клеток и разрыхления хромосом производится гипотонизация клеточной смеси;

г) Осаждение и фиксация клеток смесью метанола с ледяной уксусной кислотой;

д) Нанесение клеточной суспензии на охлажденные предметные стекла для получения микропрепаратов хромосом;

е) Рутинная или дифференциальная окраска микропрепаратов хромосом для последующей микроскопии метафазных пластинок хромосом.

Этот метод широко применяется в цитогенетических лабораториях для диагностики хромосомных болезней человека, в основе которых лежат геномные или хромосомные мутации.