Авторский состав

С. Б. Аманбаева, Н. Б. Бурамбаева, А. А. Темиржанова, Л. М. Усенова

Список использованной литературы

  1. Королева Н. С. Основы микробиологии и гигиены молока и молочных продуктов : учебник / Н. С. Королева. – М. : Легкая и пищевая промышленность, 1984. – 168 с.
  2. Лерина И. В. Лабораторные работы по микробиологии : учебное пособие для товаровед. и технол. фак. торг. вузов / И. В. Лерина, А. И. Педенко. – 2 изд., перераб. – М. : Экономика, 1986. – 128 с.
  3. Банникова Л. А. Микробиологические основы молочного производства : справочник / Л. А. Банникова, Н. С. Королева, В. Ф. Семенихина под ред. канд. техн. наук Я. И. Костина. – М. : Агропромиздат, 1987. – 400 с.
  4. Микробиология : Практикум / Л.Г. Бранцевич, Л.Н. Лысенко, В.В. Овод, А.В. Гурбик. – Киев: Вища школа, 1987. – 200 с.
  5. Бранцевич Л. Г. Микробиология, санитария и гигиена : учебник для вузов / Л. Г. Бранцевич, К. А. Мудрецова-Висс, А. А. Кудряшова, В. П. Дедюхина. – Владивосток : Изд-во ДВГАЭУ, 1997. – 312 с.
  6. Нецепляев С. В. Лабораторный практикум по микробиологии пищевых продуктов животного происхождения : практикум / С. В. Нецепляев, А. Я. Панкратов. – М. : Агропромиздат, 1990. – 223 с.
  7. Степаненко П. П. Микробиология молока и молочных продуктов : учебное пособие / П. П. Степаненко. – М. : Колос, 1996. – 271 с.

Содержание

Лабораторная работа № 9 Почвенные микробоценозы

Цель работы: изучить видовой состав и распределение почвенных микроорганизмов.

Задачи

1. Изучить характер микрофлоры почвы и доминирующие виды.

2. Произвести количественный и качественный учет микрофлоры почвы.

Материалы и оборудование. Предметные стекла, стерильные чашки Петри с МПА, весы, разновесы, скальпель, ступка, резиновая перчатка, колба со стерильной дистиллированной водой 90 мл, стерильная колба объемом 250 мл, пробирки с 9 мл стерильной воды, пипетки на 10 мл и 1 мл, микропипетки на 0,1 мл, стеклянные шпатели.

Основные понятия. Симбиоз, метабиоз, антагонизм, паразитизм.

Ход работы:

Задание 1. Изучить характер почвенных и ризосферных микробоценозов методом обрастания стекол (по Холодному).

На ровной поверхности почвы делают ножом разрез, глубина которого зависит от исследуемого горизонта. Отмытые и обезжиренные стекла (одновременно берут несколько стекол) плотно прижимают к вертикальной стенке разреза и засыпают почвой. Стекла выдерживают в почве от недели до нескольких месяцев.

После истечения времени экспозиции убирают почву с тыльной стороны стекол, опытную поверхность стекол высушивают на воздухе и фиксируют трижды, проводя тыльной стороной над пламенем горелки. После фиксации стекло погружают в воду опытной поверхностью вниз, не доводя его до дна.

После промывки препарат погружают в раствор карболового эритрозина на срок от 30 мин до 24 ч. Окрашенные препараты исследуют под микроскопом с иммерсионной системой. При микроскопировании отмечают характер микрофлоры, плотность обрастания стекол и доминирующие формы.

Задание 2. Провести определение ОМЧ почвы.

Приготовление почвенной суспензии методом разведения. Соблюдая стерильность, отвешивают 10 г почвы и переносят ее в стерильную ступку. Навеску почвы в ступке увлажняют до пастообразного состояния, добавляя 2-3 мл воды из первой колбы, содержащей 90 мл стерильной воды, и растирают 5 мин пальцем в резиновой перчатке. После растирания почву из ступки переносят с помощью воды во вторую сухую колбу, получают первое разведение – 1/10. Почвенную суспензию в колбе встряхивают в течение 5 мин, дают отстояться 30 с и далее стерильной пипеткой переносят 1 мл почвенной суспензии из колбы в пробирку № 1 с 9 мл стерильной дистиллированной воды, получают второе разведение – 1/100. Подобным образом готовят ряд последующих разведений почвенной суспензии –1/1000, 1/10000, 1/100000 и более в зависимости от предполагаемой численности микроорганизмов (рисунок 20).

Рисунок 20 – Приготовление разведений и высева почвенной суспензии на твердые питательные среды

Для выделения и количественного учета бактерий почвенную суспензию высевают на одну из питательных сред (МПА, КАА, почвенный агар, среду Эшби; для учета актиномицетов используют КАА или среду Чапека). Колонии бактерий на чашках Петри подсчитывают через 3–5 суток, грибов и дрожжей – через 5–7, актиномицетов – через 7–15. Содержание микроорганизмов в 1 г почвы определить по формуле: а=б*в, где а – количество микроорганизмов в 1 г почвы, б – среднее число колоний, в – разведение. Сравнивают видовой состав и разнообразие микрофлоры почвы, воды и воздуха и делают вывод.

Контрольные вопросы

1. Взаимоотношения между микроорганизмами почвы.

2. Экологические факторы распространения микроорганизмов почвы.